کیت سنجش پروتئین تالی- لوری
مناسب برای انجام 50، سنجش میزان پروتئین در سرم، پلاسما، ادرار، بافت.
کاربرد:
کیت تحقیقاتی به منظور سنجش مقادیر پروتئین تام با روش طیف سنجی نوری در طول موج nm650.
تاریخچه:
روش لوری برای محاسبه ی پروتئین کل اولین بار در یکی از معتبرترین مقالات بیوشیمی شرح داده شد (Lowry و همکاران؛ 1951). این روش، روشی کالریمتریک بر پایهی یونهای مس و معرف فولین سیوکالتو برای گروه های فنولی است. در این روش، اولین واکنش بیوره میباشد که در طی آن مس دو ظرفیتی (+Cu2) به مس یک ظرفیتی (+Cu) احیا میشود، در مرحله ی بعدی مس یک ظرفیتی معرف Folin-Ciocalteu (فسفومولیبدات و فسفوتنگستات) را احیا می نماید. این محصول به مولیبدنوم/تنگستن آبی احیا میشود که شدت رنگ ایجاد شده در طول موج ۷۵۰-۵۰۰ نانومتر قابل شناسایی است. روش لوری موجب تشخیص ریشه های آروماتیک در پروتئینها میشود و از آنجایی که تعداد ریشه های آرماتیک در بین پروتئینهای مختلف تفاوت دارد، استفاده از استاندارد ضروری به نظر می رسد این استاندارد بایستی تا حد ممکن از نظر تعداد ریشههای تیروزین با پروتئین مورد نظر مشابه باشد. این روش یک روش کلاسیک و آسان در جهت سنجش پروتئین تام در انواع نمونه ها می باشد.
عملکرد و اساس کیت:
روش لوری بارها مورد بررسی قرار گرفته و در مواردی اصلاح گردیده است. این تحقیقات در اغلب موارد برای تشخیص چگونگی ایجاد اختلال توسط مواد مداخله گر و همچنین چگونگی حل شدن پروتئین های نامحلول توسط دترجنت ها طراحی شده بودند. مقالات مربوط به این روش عمدتا توسط Peterson در سال 1983 بازبینی شده اند. این پروتکل نسخه Hartree از روش لوری را شرح خواهد داد. شرکت تالی ژن پارس در این روش به جای 5 معرف از 3 معرف استفاده کرده که در واکنش با برخی از پروتئین ها شدت رنگ بیشتری را نشان می دهد (که نشان دهنده ی حساسیت بالاتر است). همچنین راه اندازی آن بسیار آسان تر است و بر مشکل ته نشینی نمک معرف در روش لوری اصلی غلبه کرده است. در نهایت، فرمولاسیون معرف ها باعث بهبود شرایط پایداری آن ها خواهد شد. در این روش غلظت پروتئین تنها با استفاده از یک اسپتکروفتومتر قابل ارزیابی است. این روش تا حدی آسان تر از روش لوری اصلی است و حساسیت روش لوری اصلی را حفظ کرده است.
محتویات کیت:
1. معرف :A یک ویال 45 میلی لیتری حاوی سدیم پتاسیم تارتریت، کربنات سدیم و سدیم هیدروکسید.
مدت ماندگاری: 2-3 ماه در محفظه پلاستیکی.
2. معرف B: یک ویال 7 میلی لیتری حاوی سدیم پتاسیم تارتریت، سولفات مس و سدیم هیدروکسید.
مدت ماندگاری: 2-3 ماه در محفظه پلاستیکی.
3. معرف C: یک ویال 17 میلی لیتری حاوی فولین سیوکالتوس فنل خالص می باشد. جهت آماده سازی آن 1 میلی لیتر از معرف C را با 7 میلی لیتر آب مقطر مخلوط نمایید.
مدت ماندگاری: ساخت اين محلول به صورت روزانه مي باشد و نيازي به تنظيم pH ندارد.
4. معرف D: چهار ویال و یک بالن ژوژه ی 5 میلی لیتری حاوی 10 میلی گرم آلبومین سرم گاوی (BSA).
توضیحات: استاندارد کالیبراسیون حاوی 2000g آلبومین سرم گاوی (BSA) در هر میلی لیتر آب می باشد.
5. معرف E: یک ویال 30 میلی لیتری حاوی سدیم کلرید.
مدت نگهداری: 2-3 ماه در محفظه پلاستیکی.
شرایط نگهداری:
محتویات کیت را در دمای ℃ 4 تا تاریخ انقضاء نگهداری نمایید.
ویژگی و مزایا:
با توجه به نیاز جامعه ی علمی و در راستای خود کفایی کشور این کیت با بهره گیری از اساتید و محققین دانشگاهی عرضه گردیده است. درخواست مکرر آزمایشگاه های تشخیص طبی و محققین علوم زیستی و پزشکی جهت انجام پروژه های تحقیقاتی متمرکز بر سنجش پروتئین در نمونه های مختلف اعم از انسانی، گیاهی، جانوری و غذایی منجر به تلاش پژوهشگران داخلی در جهت تولید و بهینه سازی محصول نام برده گردیده است. در حال حاضر بسیاری از کیتهای آزمایشگاهی و تحقیقاتی مورد استفاده در بخش بالینی و پژوهشی کشور در خارج از کشور تولید می شوند. شرکت تالی ژن پارس در این روش به جای 5 معرف از 3 معرف استفاده کرده که در واکنش با برخی از پروتئین ها شدت رنگ بیشتریی را نشان می دهد (که نشان دهنده ی حساسیت بالاتر است). این کیت آسان تر از روش لوری اصلی بوده و حساسیت روش لوری اصلی را نیز حفظ کرده است. از دیگر مزایای این روش می توان پایداری معرف ها در دمای اتاق اشاره نمود.
هزینه ی این کیت تا پنجاه درصد نمونه های خارجی مشابه بوده و با کیفیت و دقتی برابر با آن ها ارائه می گردد. در مقایسه با کیت های خارجی مدت زمان طولانی جهت سفارش کیت وجود نداشته و کیت سفارشی حداکثر 72 ساعت پس از سفارش ارسال خواهد شد. بخش کنترل کیفی و پشتیبانی شرکت تالی ژن پارس 24 ساعته و هفت روز هفته آماده ی پاسخ گویی به سوالات مشتریان گرامی میباشد و در صورت بروز هرگونه خطا و یا عدم جواب دهی پکیچ دیگری جایگزین خواهد شد.